Isi

• Melangkah
• Bagian 1 dari 2: Memeriksa kalibrasi
• Bagian 2 dari 2: Menghitung hasil

Pipet adalah jenis peralatan laboratorium yang digunakan untuk mengukur dan mentransfer cairan dalam jumlah yang sangat kecil. Akurasi dan presisi dalam pengukuran pipet diperlukan karena setiap penyimpangan dalam volume yang dikirimkan dapat memengaruhi hasil percobaan. Untuk memastikan keakuratannya, perlu dilakukan pengecekan kalibrasi pipet setiap beberapa bulan. Proses kalibrasi membantu memverifikasi bahwa peralatan mengeluarkan volume yang benar sehingga dapat dipulihkan jika tidak benar.

Melangkah

Bagian 1 dari 2: Memeriksa kalibrasi

1. Kumpulkan bahan-bahan yang diperlukan. Untuk memeriksa kalibrasi pipet, Anda memerlukan pipet, ujung pipet, air suling, gelas kimia, termometer, timbangan, dan piring. Timbangan harus mikrogram khusus untuk mengkalibrasi mikropipet dengan maksimum 1 µl.
   • Anda tidak membutuhkan lebih dari 5 ml air. Isi cangkir dengan air.
   • Pastikan ujung pipet terpasang dengan benar.
2. Ukur suhu air suling. Letakkan termometer di dalam air dan diamkan setidaknya selama satu menit. Jika garis merah pada termometer masih bergerak, biarkan satu menit lagi. Setelah satu menit, tulis suhu di buku catatan. Lepaskan termometer dan keringkan setelah selesai.
   • Suhu air penting untuk perhitungan yang dilakukan untuk memeriksa kalibrasi.
3. Tempatkan timbangan pada timbangan dan setel ke nol. Idealnya, Anda menggunakan timbangan dengan pintu dan ruangan berinsulasi. Tempatkan mangkuk di dalam ruangan dan tutup pintunya. Jika tidak ada pintu, letakkan mangkuk di atas timbangan. Tekan tombol "Nol" atau "Tare" dan tunggu saldo menjadi nol.
   • Dengan mengatur timbangan ke nol, berat mangkuk plastik tidak diperhitungkan dan menjadi mungkin untuk mengukur hanya berat dari apa yang Anda masukkan ke dalam mangkuk.
4. Siapkan pipet untuk kalibrasi. Sebelum memulai, seka pipet dengan etanol untuk membunuh kontaminan - selain itu, pastikan ujung pipet tidak tersumbat. Tempatkan ujung yang benar di ujung dan atur volume yang ingin Anda uji.
   • Sebelum kalibrasi, Anda menguji volume terkecil dan volume terbesar yang dapat dikeluarkan pipet.
5. Siram ujungnya sebelum mengkalibrasi. Tekan tombol ke dalam stop pertama dan masukkan ujungnya ke dalam air suling sehingga sekitar 2 mm terendam dalam cairan. Lepaskan tombol untuk mengambil cairan, lalu keluarkan kembali dengan menekan tombol. Ulangi ini tiga kali untuk menyiram ujungnya.
   • Tekan tombol ke pemberhentian kedua untuk mengeluarkan cairan yang tersisa di ujung dan keluarkan pipet dari air.
6. Siapkan volume kalibrasi. Dengan ujung keluar dari cairan, tekan tombol ke bawah hingga berhenti pertama. Tempatkan sekitar 2 mm dari ujung di air suling dan lepaskan tombol untuk menarik cairan ke ujung. Tunggu sekitar satu detik sebelum mengeluarkan ujungnya dari air.
   • Pastikan ujungnya benar-benar terendam selama seluruh proses aspirasi. Anda tidak ingin gelembung di ujungnya atau hasilnya tidak akan benar.
7. Dosis cairan dalam mangkuk pada timbangan. Letakkan ujungnya di bagian bawah mangkuk dan tekan tombol ke bawah hingga pemberhentian pertama. Pindah ke tempat lain, agak jauh dari air, dan tekan tombol ke pemberhentian kedua. Tahan tombol dan angkat ujung mangkuk.
   • Pertahankan ujung pipet, karena Anda akan menggunakannya lagi untuk melakukan lebih banyak uji kalibrasi. Pastikan ujungnya tidak menyentuh apapun.
8. Catat bobot yang menunjukkan keseimbangan. Tutup pintunya jika Anda menggunakan timbangan di ruangan yang terisolasi. Tunggu hingga nilainya berhenti berubah. Catat nilai ini di buku catatan Anda.
   • Penting untuk menunggu angka stabil sebelum menuliskannya. Bacaan Anda akan salah jika Anda tidak menunggu.
9. Ulangi proses ini sampai Anda telah melakukan setidaknya 10 pengukuran. Atur keseimbangan menjadi nol, siram ujungnya, tarik volume yang sama, keluarkan volume dan catat beratnya. Anda memerlukan beberapa rekaman dengan volume yang sama dan kemudian Anda dapat menghitung rata-rata dari semua rekaman secara bersamaan.
   • Anda dapat mengulangi proses yang sama ini dengan volume yang berbeda, selama Anda melakukan beberapa pengukuran per volume.

Bagian 2 dari 2: Menghitung hasil

1. Gunakan rumus untuk volume yang dihitung. Rumus menghitung volume yang dikirimkan oleh pipet adalah V = w * Z, di mana w adalah berat air, Z adalah faktor konversi berdasarkan massa jenis air, dan V adalah volume yang dihitung dari berapa banyak air. ada yang diserahkan.
   • Anda dapat menemukan variabel Z dengan mencari massa jenis air menggunakan suhu yang tercatat di awal percobaan.
   • Contoh: Jika suhu air adalah 23 ° C, maka diasumsikan nilai Z 1,0035 µg / mg.
2. Hitung mean dari percobaan yang berulang. Anda harus menimbang volume air yang dikeluarkan oleh pipet setidaknya 10 kali. Untuk menghitung rata-rata dari semua nilai ini, jumlahkan semuanya dan bagi dengan 10. Jika Anda telah melakukan lebih banyak atau lebih sedikit percobaan, tambahkan setiap percobaan dan bagi jumlahnya dengan jumlah total percobaan.
   • Misalnya: Sepuluh anak timbangan yang Anda daftarkan untuk volume pipet 10µl adalah sebagai berikut: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 dan 9.98.
   • Rata-rata adalah: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Terapkan variabel ke persamaan dan selesaikan. Setelah Anda menentukan nilai yang benar untuk setiap variabel, Anda dapat memasukkannya ke dalam persamaan dan menyelesaikan volume yang dihitung. Untuk menyelesaikannya, cukup kalikan bobot rata-rata semua nilai uji dengan nilai Z.
   • Misalnya: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Hitung akurasi pipet. Untuk menghitung akurasi dapat menggunakan persamaan A = 100 x V._rata-rata/ V₀ dengan A adalah ketepatan pipet, V._rata-rata volume rata-rata yang dihitung, dan V.₀ nilai yang Anda tetapkan untuk pipet. Akurasi harus antara 99-101%.
   • Jika pipet dikalibrasi dengan benar, nilai yang dihitung harus sangat dekat dengan nilai sebenarnya yang Anda tetapkan pada pipet.
   • Misalnya: A = 100 x V._rata-rata/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Pipet ini dikalibrasi dengan benar.
5. Kirim pipet untuk kalibrasi, jika perlu. Jika pipet Anda gagal dalam uji kalibrasi, segera hentikan penggunaannya untuk eksperimen. Pipet adalah bagian peralatan laboratorium yang sangat halus dan mahal. Anda tidak dapat memperbaiki kalibrasi sendiri, jadi Anda harus mengirimkannya untuk perawatan yang benar. Atau, beberapa perusahaan akan datang ke lab Anda dan mengkalibrasi pipet Anda di sana.
   • Untuk pemeliharaan, hubungi perusahaan yang membuat merek pipet khusus Anda.